揚州水產運輸聯盟

干血點采樣技術

天津市醫藥科學研究所2020-01-10 09:30:12

點擊上方藍色字體,關注我們

15

在進行藥動學研究血藥濃度測定時,往往需要采集大量的全血以獲得檢測所需的血漿或血清量。然而在臨床前試驗中,每只動物的全血量是有限的,如若多只動物血樣混合又會使數據出現偏差。血漿的處理要使用固相萃取、液液萃取或者蛋白沉淀等方法,不僅耗時耗力,也降低了數據的準確性和重現性。而且,傳統血樣的運輸和儲存也多有不便,影響穩定性。

干血點(dried blood spot,DBS)采樣法,作為一種采集生物樣品的新型替代技術,克服了傳統方法的諸多缺點,采血量較小,樣品儲存運輸方便,特別適合小動物的連續樣品采集。目前DBS?法已廣泛應用在諸多領域中,為臨床前藥動學研究提供可靠、便捷的技術支持。



干血點采楊技術

干血點采樣,即將全血樣品收集在卡紙上,作為一種采集生物樣品的新型替代技術,在血樣采集方法上比傳統方法有一定的優勢。它需求較少的血量(通常小于?100?μL),可減少動物使用。方便血樣采集,樣本直接涂敷于紙板,無需使用另外采集容器。方便室溫儲存和運輸,簡化樣品前處理。特別適合小動物的連續樣品采集。




樣品采集方法

小動物(如小鼠、大鼠)可以從尾部采血。將血樣直接滴到采樣卡的圓圈內,也可以使用加樣槍將血樣點到采樣卡上,這樣可避免潛在的血細胞比容差異、采血量的影響、血樣在采樣卡上分布不均勻等采樣錯誤。加樣槍頭應距離采樣卡若干毫米,當血樣碰觸到卡時會迅速分散開,使血樣在卡上分布均勻。



樣品干燥、儲存和運輸方法?

在儲存和運輸前,DBS?樣品必須經過干燥。一般,在室溫開放環境(1522?℃)下,干燥時間至少為?23h。干燥時間取決于采樣卡的類型以及采血量的多少。注意樣品不能加熱、重疊放置或者接觸其他表面,需要的話應避免陽光直射。在干燥之后,為避免?DBS?樣品接觸水分或濕氣而改變提取率或發生降解,可用紙覆蓋?DBS?樣品并裝進含有干燥劑的封口袋里。另外,包裝袋內應含有濕度指示劑。通過這種方式包裝的?DBS?樣品可在室溫下儲存數周至數年。如果樣品含有不穩定的化合物,則應儲存在低溫環境。按照上述方法包裝的?DBS?樣品可通過郵寄方式運輸,在此期間不需考慮血樣暴露或者傳染性物質等問題。


樣品的提取

在定量分析時,從?DBS?卡上打下一個或多個一定直徑的圓片放入分析試管或?96?孔板中進行提取。利用合適的提取溶劑破壞基質或濾紙里分析物與蛋白的結合,并通過振蕩或者渦旋等方式將分析物洗脫下來,渦旋時間一般為2060?s,必要時也可采用超聲處理來提高提取效率。離心之后,將提取物轉移到進樣瓶中直接進樣,或者吹干后用流動相復溶進樣。



相較于傳統的血樣采集方法,DBS?采集全血樣品具備了一定優勢。DBS?的采血量少,特別適合小動物的血樣采集;使用DBS采集全血的預處理簡單,無需冷凍離心分離血漿;DBS?樣品儲存方便,可通過普通的郵政系統運輸,無需冰箱或者干冰。但是作為一種新方法,DBS?法尚存不足,如,測定結果的準確性可能受點樣條件影響;不適用于不穩定的藥物。雖然?DBS?技術還有待完善,但其較一般樣品采集及處理方法顯示出的優點使其在藥動學研究的應用范圍越來越廣泛。



圖文供稿:孔

圖文編輯:胡志潔

聯系我們:[email protected]


?? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?



辽宁快乐12玩法 内蒙古11选五开奖遗漏查询 股票融资融券是什么意思是否利好消息 江苏十一选五走势路 宁夏十一选五基本走越 北京pk10必中8码方法 彩票开奖查询河北快三 基本走势图 新疆11选5推荐号码 大乐透6种口诀 在线股票操盘软件开